Heparin Seplife CL-6B是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一種新型親和層析介質(zhì),是將肝素偶聯(lián)到交聯(lián)瓊脂糖凝膠過(guò)濾層析介質(zhì)上。肝素是一種含硫酸酯的酸性多糖,能和抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干擾素、核酸結(jié)合蛋白、限制內(nèi)切酶、凝血酶及類凝血酶等生物大分子結(jié)合,因此本產(chǎn)品可應(yīng)用于上述產(chǎn)品的分離純化,同時(shí)產(chǎn)品基團(tuán)脫落少,使用壽命長(zhǎng),操作方便。
產(chǎn)品牌號(hào) | Heparin Seplife CL-6B |
外觀 | 球狀凝膠,無(wú)臭無(wú)味 |
基質(zhì) | Seplife CL-6B |
配基 | 肝素 |
形狀 | 球形 |
壓力流速(cm/h) | 110~210cm/h(在0.15Mpa) |
粒徑(μm) | 45~165 |
吸附量 | >3mg抗凝血因子Ⅲ(ATⅢ)/ml |
配基密度 | >5mg/ml |
pH穩(wěn)定性 | 4~10(長(zhǎng)期);3~13(短期,在位清洗[CIP]) |
耐熱性 | 121℃,0.02M NaH2PO4 pH7.5,30min,5次 |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 在常用水相溶液中穩(wěn)定:0.1M氫氧化鈉;0.05M乙酸鈉;8M尿素;6M鹽酸胍;非離子去污劑;10%丙三醇 |
應(yīng)用 | 適用于抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子等生物大分子的純化 |
使用方法
3.1 裝柱
裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。
3.2平衡
用2~5個(gè)柱床體積的初始緩沖溶液進(jìn)行平衡,直至pH和電導(dǎo)率保持不變。常用的緩沖液為pH 7.4~8.0的0.02mol/L~0.05mol/L的Tris-HCl或PBS緩沖液。
3.3上樣
樣品的預(yù)處理:樣品需先用0.45μm濾膜過(guò)濾,然后上樣,以免堵塞層析柱。上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇,也可通過(guò)線性實(shí)驗(yàn)找到最佳上樣量。
3.4洗脫
可通過(guò)改變離子強(qiáng)度來(lái)達(dá)到洗脫效果,一般可在pH7.4~8.0的緩沖液中加0.2~2mol/L NaCl進(jìn)行,也可改變pH值來(lái)進(jìn)行洗脫。一般洗脫方式有恒定洗脫、梯度洗脫、階躍洗脫,推薦使用梯度洗脫。
3.5 再生
先用0.1mol/L Tris-HCl pH7.0緩沖液洗3個(gè)柱床體積,然后用0.1mol/L NaOH(含2mol/L NaCl)洗3個(gè)柱床體積,最后用20%乙醇溶液洗3個(gè)柱床體積。經(jīng)常用酸堿洗填料會(huì)使填料的吸附能力下降,所以清洗要盡量縮短時(shí)間。
3.6在位清洗
(1)去除因離子交換作用吸附的蛋白:用2mol/L NaCl溶液反向清洗2~3個(gè)柱床體積。
(2)去除強(qiáng)疏水性蛋白和脂質(zhì)等:用70%乙醇或者30%異丙醇反向清洗4個(gè)柱床體積。
3.7存儲(chǔ)
密封保存在4~8℃(保存溶液為20%乙醇+0.05mol/L乙酸鈉緩沖液)干燥、通風(fēng)、清潔處,不可冷凍;用過(guò)的柱子保存在4~8℃,20%乙醇+0.05mol/L乙酸鈉緩沖液中。
3.8運(yùn)輸
運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
注意事項(xiàng)
(1)該介質(zhì)從冷室或冰箱中取出后最好在室溫下恢復(fù)到室溫,然后緩慢搖勻后裝柱,以免產(chǎn)生氣泡影響柱效。
(2)吸附:20mmol/L~50mmol/L,pH7.4~8.0的緩沖液,為避免離子交換的干擾,緩沖液可適當(dāng)加50mmol/L~100mmol/L NaCl,最常用的為T(mén)ris-HCl 緩沖溶液。
(3)上樣樣品必須與平衡柱子緩沖液的pH、電導(dǎo)相同。
(4)洗脫過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,且勿過(guò)快。
(5)加樣及整個(gè)洗脫過(guò)程中,嚴(yán)防柱面變干。
產(chǎn)品牌號(hào) | 貨號(hào) | 包裝規(guī)格 |
Heparin Seplife CL-6B | A4032202 | 25ml |
A4032203 | 100ml | |
A4032204 | 500ml | |
A4032205 | 1L | |
A4032206 | 5L | |
A4032207 | 10L |
生產(chǎn)日期:見(jiàn)標(biāo)簽
使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊(cè)人名稱/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊(cè)人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開(kāi)發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園
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