MMC Large Scale HP瓊脂糖層析介質(zhì)以高流速瓊脂糖為基質(zhì)，是一種多模式層析介質(zhì)，同時(shí)具有陽(yáng)離子交換、疏水和氫鍵作用力，可在高鹽條件下結(jié)合蛋白，樣品無(wú)需稀釋即可直接上樣。它具有高分辨率、高流速、高載量及良好的化學(xué)穩(wěn)定性和物理性能，可以縮短生產(chǎn)周期，提高生產(chǎn)效率，可用于高鹽條件下蛋白質(zhì)色譜純化。

使用方法

3.1 裝柱

裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度，凝膠裝柱前需要脫氣。

3.2平衡

使用至少5倍柱床體積的起始緩沖溶液平衡柱子，直至流出液的電導(dǎo)和pH保持不變，起始緩沖液的pH比目標(biāo)蛋白的等電點(diǎn)低0.5~2.0個(gè)pH。

3.3上樣

樣品用緩沖液配制，渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣。

3.4洗脫

用緩沖液洗脫，洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。

3.5再生

用高離子強(qiáng)度的溶液洗脫可逆性的結(jié)合物（如2M NaCl的緩沖液），將pH調(diào)至10~11。使用至少5倍柱床體積的起始緩沖液沖洗，直至流出液的電導(dǎo)和pH保持不變。

3.6在位清洗

（1）對(duì)于以離子鍵結(jié)合的蛋白，可以用0.5~2倍柱床體積的2M NaCl反相沖洗10~15min。

（2）對(duì)于沉淀蛋白、疏水性結(jié)合的蛋白或脂類(lèi)，可用1M NaOH ，流速40cm/h反相沖洗1~2h去除。

（3）對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類(lèi)等，可用2~4倍柱床體積的70%乙醇或30%異丙醇反相清洗。但需注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡。

清洗完畢后需用至少3倍柱床體積的平衡緩沖溶液平衡柱子，直至pH和電導(dǎo)保持不變。

3.7存儲(chǔ)

密封貯存在4~30℃（保存溶液為20%乙醇），通風(fēng)、干燥、清潔的地方，不能冷凍。用過(guò)的柱子貯存在4℃，20%乙醇溶液中。

3.8運(yùn)輸

運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。

注意事項(xiàng)

（1）樣品必須澄清沒(méi)有顆粒。

（2）樣品與層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后，才能進(jìn)行柱層析。 

（3）所裝的柱床必須表面平整，無(wú)溝流及氣泡，否則應(yīng)重裝。

（4）洗脫過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速，且勿過(guò)快。

（5）加樣及整個(gè)洗脫過(guò)程中，嚴(yán)防柱面變干。

（6）本品應(yīng)避免與氧化劑接觸，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中。 

生產(chǎn)日期：見(jiàn)標(biāo)簽

使用期限：在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年

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