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2022-05-19 09:28:30

藍(lán)曉離子交換介質(zhì)那么多，該如何選擇

種類多是為了更精細(xì)更精準(zhǔn)匹配不同的項目，基質(zhì)是 Seplife BB系列的離子交換介質(zhì)粒徑是100-300um，裝柱在高流速下依然有較低的背壓，適合粘度比較大樣...

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2022-05-19 09:26:44

蛋白質(zhì)純化過程中失活

a.蛋白去折疊或聚集:優(yōu)化緩沖液使其利于蛋白質(zhì)保持穩(wěn)定。蛋白質(zhì)在介質(zhì)上的高密度下容易聚集可以添加一些蛋白的增溶劑等。b.純化過程中保持蛋白的活性的輔助因子被去除...

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2022-05-19 09:24:15

蛋白結(jié)合在柱床上未洗脫出

a.蛋白和介質(zhì)結(jié)合力過強(qiáng):增加洗脫強(qiáng)度，比如his蛋白和鎳柱結(jié)合，可以增加取代基咪唑的濃度。b.蛋白聚集在層析柱上:通過調(diào)整層析過程的緩沖液增加蛋白的穩(wěn)定性，改...

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2022-05-19 09:20:18

his標(biāo)簽蛋白和鎳柱不結(jié)合

a.標(biāo)簽未翻譯或標(biāo)簽被包裹在結(jié)構(gòu)內(nèi)部:檢查質(zhì)粒序列或?qū)?biāo)簽移到其他位置，標(biāo)簽移到其它位置扔被包裹在結(jié)構(gòu)內(nèi)部時，就要將標(biāo)簽暴露出來b.結(jié)合緩沖液不合適及層析柱沒平...

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2022-01-05 18:27:34

重組蛋白標(biāo)簽的意義及常用標(biāo)簽

蛋白質(zhì)作為生命活動的主要執(zhí)行者，絕大多數(shù)疾病的發(fā)生都與其結(jié)構(gòu)、功能密切相關(guān)。因此，想要對某一特定的蛋白進(jìn)行分析與研究則成為一項頗為棘手的問題。此時，蛋白標(biāo)簽（P...

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2021-12-31 19:12:14

多模式層析——pH和鹽雙梯度洗脫賦能抗體高效純化

多模式層析：pH和鹽雙梯度洗脫賦能抗體高效純化樣品：rProtein A Seplife Suno洗脫液(pH7.83， cond:11.84mS/cm，con...

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2021-12-31 18:52:18

生物工藝中常用添加劑解析

表一：蛋白質(zhì)純化中用于增強(qiáng)蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的常用添加劑。TritonX -114溫度在22℃以上時，在蛋白質(zhì)溶液中加入2%的TritonX -114可使蛋白質(zhì)從去垢...

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2021-12-23 13:28:40

抗體純化中Protein A親和層析階段HCP去除策略

宿主細(xì)胞蛋白（host cell proteins,HCPs)是基因工程菌株細(xì)胞株產(chǎn)生的與基因工程目的產(chǎn)物——抗體蛋白及Fc融合蛋白無關(guān)的蛋白混合物，HCP的組...

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2021-12-23 13:12:49

全面解析His標(biāo)簽蛋白純化及金屬螯合層析

His-Tag融合蛋白簡介His-Tag融合蛋白是目前最常見的蛋白表達(dá)方式，而且很成熟，它的優(yōu)點(diǎn)是表達(dá)方便且不影響蛋白的活性，無論是可溶性表達(dá)或者包涵體都可以用...

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2021-12-23 13:05:18

His標(biāo)簽蛋白用鎳柱純化有雜帶怎么辦

問:His標(biāo)簽蛋白鎳柱純化有雜帶怎么辦？1.樣品本身的的屬性，His蛋白容易被體系中的蛋白酶降解時，此時就要在樣品中加入蛋白酶抑制劑。避免在純化過程中His蛋白...

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