重慶蛋白純化批發(fā)價格
發(fā)布時間:2023-06-03 01:48:35
重慶蛋白純化批發(fā)價格
親和層析介質(zhì)的特點(diǎn):1、基于配體和分離物間的特異性親和作用,分離選擇性強(qiáng),效果好,純化倍數(shù)高。2、能完成一步方法很難完成的分離,如變性和非變性的,功能不同的蛋白。3、通常一步純化就可達(dá)到>90%的純度。4、速度快,操作簡單。

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質(zhì)粒DNA純化親和層析介質(zhì):Plasmid Seplife LX層析介質(zhì)是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一種新型高度交聯(lián)的親硫芳香族瓊脂糖層析介質(zhì),利用配基的嗜硫吸附,適用于分離純化閉環(huán)的超螺旋質(zhì)粒DNA,廣泛應(yīng)用于基因治療和DNA疫苗的開發(fā)應(yīng)用。該層析介質(zhì)具有高流速、低反壓、非特異性吸附低、良好的親水性、化學(xué)穩(wěn)定性和機(jī)械性特點(diǎn),方便進(jìn)行規(guī)模放大,可縮短生產(chǎn)時間,提高生產(chǎn)效率。

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金屬螯合親和層析介質(zhì):組氨酸(His)的殘基上帶有一個咪唑基團(tuán),可以和Ni2+,Co2+等過渡金屬離子形成配位鍵而選擇性的結(jié)合在金屬離子上,這些金屬離子能夠用螯合配體固定在層析介質(zhì)上,因此帶有組氨酸標(biāo)簽的蛋白在經(jīng)過裝配了金屬離子的層析介質(zhì)時可以選擇性的結(jié)合在介質(zhì)上,而其他的雜質(zhì)蛋白則不能結(jié)合或者僅能微弱結(jié)合。結(jié)合在介質(zhì)上的HIS標(biāo)簽蛋白可以通過提高緩沖液中的咪唑濃度進(jìn)行競爭性洗脫,從而得到較高純度的HIS標(biāo)簽蛋白。

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層析填料被污染或老化:隨著填料的使用,一些雜質(zhì)的積累會使層析填料的孔徑發(fā)生變化(如堵塞,非特異性吸附積累,微生物污染,破碎等),導(dǎo)致其排阻能力發(fā)生偏差而影響分離度。此時可對填料進(jìn)行CIP清洗,若清洗后還不能達(dá)到分離要求,就要更換新的填料。

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溶菌緩沖液和純化工藝的前期步驟中常常會添加蛋白酶抑制劑以防止目標(biāo)蛋白質(zhì)被內(nèi)源性蛋白酶酶解。而純化工藝的后期一般不用再添加這些蛋白酶抑制劑,因為此時幾乎所有的蛋白酶都已經(jīng)從目標(biāo)蛋白質(zhì)分離出去。蛋白質(zhì)的保存緩沖液中通常要添加金屬螯合劑,如EDTA或EGTA。這些金屬螯合劑與 Mg2+結(jié)合以防止目標(biāo)蛋白質(zhì)被所含的金屬蛋白酶分解。還有一些其他的添加劑,主要是用來保護(hù)蛋白質(zhì)不被破壞和增強(qiáng)其溶解性。

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CHO細(xì)胞培養(yǎng)后先經(jīng)過離心的方式去除細(xì)胞及細(xì)胞碎片,也可用微濾或者深層過濾的方式去除細(xì)胞及細(xì)胞碎片。去除細(xì)胞和細(xì)胞碎片后用rProtein A親和層析介質(zhì)經(jīng)親和層析捕獲,把單抗從培養(yǎng)液中快速的捕獲出來,此步驟可以去除大量的HCP,單抗去折疊片段,病毒及HCD和培養(yǎng)基組份物質(zhì)。